微生物实验中培养基的配置应该注意什么?

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微生物实验中培养基的配置应该注意什么?,第1张

微生物实验中培养基的配置应该注意什么?
导读:1、常用玻璃仪器的准备 制备培养基所用的吸管、锥形瓶、毛细吸管、平皿等玻璃仪器用前要用肥皂水洗刷后用清水冲洗干净,晾干后备用。 (1)平皿用纸或布包好,或装在金属盒内,于121℃高压蒸汽菌3min后烘干,备用。 (2)试管管口用棉花塞

1、常用玻璃仪器的准备

制备培养基所用的吸管、锥形瓶、毛细吸管、平皿等玻璃仪器用前要用肥皂水洗刷后用清水冲洗干净,晾干后备用。

(1)平皿用纸或布包好,或装在金属盒内,于121℃高压蒸汽菌3min后烘干,备用。

(2)试管管口用棉花塞或硅氟塑料试管塞塞好,再用布或报纸包扎好,121℃高压蒸汽灭菌20℃后烘干,备用。

(3)吸管及滴管先用少许棉花塞于吸口端(防止污染物吸出,或橡皮帽内的气体污染),然后用纸包后或装入金属吸管筒内,于121℃高压蒸汽灭菌20min后烘干,备用。其他玻璃器皿均应按上法处理,也应装金属筒内160℃干热灭菌2h后,备用。

2、培养基的制备及储存

(1)溶化:一般应放在玻璃器皿或搪瓷齐内。加入蒸馏水,隔水加热以促其溶解,加热时应经常搅拌,防止焦结,待其溶解后补足水分。

在使用干燥培养基时,先将蒸馏水按定量加入容器中,然后称取一定量培养基干粉放入水中,静置10—15min,搅拌,振荡,或延长时间以促进溶解,一般不要热,必要时加热,但时间不宜过长,温度不宜过高,避免某些营养成分被破坏。

(2)校正酸碱度(调节pH):培养基必须有适当的pH。因此测定pH是培养基配制过程中的重要步骤之一,测定pH的标准温度为25士2℃。调节pH可用无菌的1mol/l氢氧化钠溶液或10%碳酸钠溶液、1mol/l盐酸溶液。当调节缓冲液的pH时,宜用6mol/l磷酸或10mol/l氢氧化钾溶液。灭菌后的pH会比灭菌前的pH升高或降低,一般高压灭菌前培养基的pH会比最终pH调高02左右,灭菌后基本合适。因此对培养基、缓冲液、试剂在灭菌前后的pH均进行测定,并记下每次pH的测定结果,有助于积累数据考察每种培养基、缓冲液、试剂对灭菌程序的耐受性,从而指导灭菌前pH的调节。干燥培养基一般已校正过pH,用时也必须再验证。测定时,一般用指示剂滴入培养基观察其颜色的变化,或用pH计校正,如与所需pH不符,可用以上的酸或碱液加以校正。调整pH后要加热过滤,使培养基澄清。

(3)培养基的分装:大批量配制时使用的自动分配器须经校准和确认。每次使用前后,均要对分配器的管道系统进行冲洗,在分装无菌培养基前,则要采用无菌硅胶管。

固体培养基一般分装在250ml、500ml锥形瓶中,高压灭菌后根据需要分装平皿或试管。

平皿:倾注平皿,应在无菌室中放置3—4h,如用塑料平皿须在35℃培养箱 中倒置30—60min。让水蒸汽自然蒸发。

斜面:制备低层斜面分装于试管,约占容积1/5,灭菌后趁热斜放在细玻璃棒和木杆上,使成斜度,分装使注意管口和瓶塞上勿沾有培养基,如沾有培养基应用布抹去,以避免污染。

高层斜面:制备高层斜面分装于试管,约占试管容积的1/3,灭菌后趁热放置成高层短斜面,待其凝固后应用。

分装好的培养基或缓冲液等及时密封后必须在配制当天(2h内最佳)进行灭菌处理。液体、半固体培养基一般在高压灭前分装,约装试管容积的1/3,在灭菌后还要加其他成分的液体、半固体培养基,灭菌后再分装于灭菌试管或锥形瓶中。

培养基的灭菌:培养基的灭菌多采用高压蒸汽灭菌,各种培养基的灭菌时间和压力,按其成分不同而定。普通培养基采用121℃、10342kPa灭菌15min,但容器和装量较大时,应延长至20min。含糖培养基115℃、6885kPa灭菌30min。含糖、血清、鸡蛋等培养基可用流动蒸汽及血清凝固器80—100℃、30min,连续3d,间歇灭菌。血清或组织液,采用低热56—58水浴1h,连续5—6d灭菌,一些遇高温即被破坏的物质如尿素、腹水等,可用细菌过滤器,过滤除菌。高压灭菌应严格按照操作规程执行,必须逐渐加热,彻底排除灭菌器内的空气,再逐渐升压保持预定的压力和时间,达到全部杀灭微生物。以上的灭菌时间和温度要经过验证确认,如不同类型培养基混合一起灭菌时宜采用115℃、6885kPa灭菌30min为好。

霉菌检测中与微生物检测常见问题的分析

 霉菌:不是分类学上的名词,而是一些丝状真菌的通称,属真菌的一部分;其对人类具有双重性,有利的方面是它可以用来酿造、工业发酵、抗生素和酶制剂的生产等,不利方面是它能引起农副产品、食品、原料及器材的腐烂,也感染并引起人类和动、植物的多种疾病,少数种类,如黄曲霉,能产生黄曲霉毒素,黄曲霉毒素是一种致癌物质,危害人、畜的健康和生命。因此,霉菌的检测对于食品的安全性很重要。下面是我为大家带来的关于霉菌检测中与微生物检测常见问题的分析的知识,欢迎阅读。

  检测中的注意事项:

 食品中常见的霉菌:毛霉属、根霉属、曲霉属、青霉属等。

 1、 取样的代表性。

 2、 取样工具的无菌。空气中霉菌的孢子含量很高,所以,取样的工具、容器等要经过严格的高压灭菌。

 3、 检样的方法。

 (1)、由于霉菌易被携带,所以,检样时操作人员应尽量避免自身携带的可能。

 (2)、样品的均质及充分振摇。因为有些孢子是连成串的,故均质和振摇能使其充分散开,同时,在各梯度连续稀释时,也要用灭菌吸管反复吹吸几次,使孢子充分散开。

 4、培养温度和时间。培养温度25—28℃培养,3天后观察,需培养观察一周。

 霉菌检验中常用的培养基:孟加拉红琼脂、马铃薯葡萄糖琼脂、察氏琼脂、高盐察氏琼脂等。

  检样中常见的问题:

 (1) 不同稀释度计数结果相同。

 (2) 不生长或生长很好连成片无法计数。

 原因:(1)稀释时未经反复振摇,吹吸,导致孢子未充分散开,影响了计数的结果。

 (2)由于培养基不适宜,PH值低等,致使生长较慢。

 (3)观察时间的掌握。真菌生长较慢,故需3d后才能观察出结果。每天都要观察结果。

  微生物操作中常见问题的讨论与分析:

 1、 划线获得单个菌落的方法。划不出单个菌落的原因:

 (1) 平板上有过多的水分;

 (2) 划线时接种环未经反复灼烧。

 (3) 多区划线,三区或四区划线。

 2、 涂布和倾注的区别:

 涂布利于观察,但由于涂布棒上会带有少量的菌液,影响计数的准确性。

 涂布更为准确,但不利于观察菌落的状态。

 3、 培养基配制时应注意的问题:

 (1)灭菌温度要严格控制,按照要求灭菌,尤其含糖量较高的培养基温度不应太高,过高会导致糖分焦化,影响质量。

 (2)琼脂培养基不能反复溶化。反复溶化会破坏培养基中的营养成分。

 (3)培养基不能反复灭菌,反复灭菌也会导致营养成分的破坏。

 (4)含琼脂的培养基灭菌后,要摇匀。

 4、 平板的保存:大多数平板如VRBA、DC、、尿素酶生化管、显色系列等要避光低温保存。

 5、 产品的保存:

 (1) 干粉培养基:避光干燥,结块后不能使用。

 (2) 亚碲酸钾卵黄增菌液、50%卵黄乳液等:冷冻保存,使用时,要常温解冻,避免水浴加热。

 (3) 抗生素类:冷藏保存,温度过高会导致灵敏度的下降。

 (4) 兔血浆:冷藏保存少量的红色不会影响结果。

 6、 观察时间的掌握:

 按SN、GB等标准或培养基的使用说明所述时间进行观察,时间过短或时间过长,单菌落的特征都不会很明显。如单增李斯特氏菌显色培养基,时间短单菌落看不到卵磷脂环,时间长绵羊李氏菌也会产生沉淀环。OXA、PALCAM的观察也如此,时间过长,李氏菌使整个平板成黑色,不利于观察单个菌落。

 7、 添加剂的添加:

 (1)温度的掌握。卵黄和抗生素类添加的温度都不应太高。

 (2)定量。过多会抑制一些目标菌,太少又导致杂菌的过度生长。

 8、 培养温度的掌握:

 (1)真菌类。25—28℃培养

 (2)细菌类。李氏菌在增菌和生化中要求培养温度在30℃左右。

 (3)其他一般在36℃左右

 9、 接种方法:常用的方法主要有划线、三点接种、穿刺接种、倾注接种、涂布接种、液体接种。

 10、革兰氏染色方法:染色时间的掌握、冲洗的方法。

 11、生化实验:

 (1)接种的方法

 (2)氧化型和发酵型实验操作

 (3)阳性菌种的对照

 (4)接种前的纯化。挑取单个菌落进行一系列的生化。

 12、关于杀菌的几个概念:

 (1)抑制:是在亚抑制剂量因子作用下导致微生物生长停止,但在移去这些因子后生长仍可以恢复的生物学现象。

 (2)死亡:在致死剂量因子的作用下或在亚致死剂量因子长时间的作用下,导致微生物生长能力不可逆丧失,即使移去这种因子后生长仍不能恢复的生物学现象。

 (3)防腐:在某些化学物质或物理因子作用下,能防止或抑制微生物生长的一种措施,它能防止食物腐坏或防止食物霉变。

 (4)消毒:利用某种方法杀死或灭活物质或物体中所有病原微生物的一种措施,它可以起到防止感染和传播的作用。

 (5)灭菌:利用某种方法杀死物体中包括芽孢在内的所有病原微生物的一种措施。

 (6)化疗:利用具有选择毒性的化学物质,例磺胺、抗生素等对生物体内部被微生物感染的组织或病变细胞进行治疗,以杀死组织内的病原微生物或病变细胞,但对有机体无毒害作用的治疗措施。

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蚊子产卵真的好像3D打印,为何会用这种方式?你知道原因吗?

蚊子繁育的情况下并没有在土里产卵,只是在水中,并且蚊子的稚虫就在水中存活,并且蚊子生长发育成大家见到的模样,是必须通过许多个周期的下边就来具体掌握蚊子的发育繁育全过程吧。

饮血缘故

蚊子往往会饮血,也许它自身也不愿意,可是没法,蚊子不能自己生成造成卵子的蛋白,因此 这类蛋白只有从哺乳类动物的血液循环系统中得到了。蚊子吸满血以后,大概通过3-4天的时间,将血夜溶解,随后生成卵子,这个时候与男性蚊子配种后就可以产卵了。

蚊子的卵

蚊子产卵是在水中,依据蚊子的种类不一样,卵关键有三种种类,在水中在河面与在岸上,蚊子的卵卵化必须2-5天的时间,蚊子卵化以后,便是水里的一种微生物。

稚虫详细说明

孑孓便是蚊子的稚虫,在水中存活,以浮肿的细微有机化合物和微生物菌种为食材,因此 在环境污染比较大的水里,这类微生物非常多,并且在这里周边蚊子也毫无疑问尤其多。孑孓的生长发育时间仅有10-14天,随后就会慢慢变为蛹。

蚊子的蛹

变为蛹后将不容易进餐,可是能够在水中摆动,而且借助第一对吸气角开展吸气,蛹仅用通过一天的时间就彻底成熟了,随后就会变为大家日常生活见到的蚊子。蚊子分成男性和雌虫,男性蚊子不饮血。

降水的是多少,温度的多少与蚊虫的繁殖也息息相关。降雨量大,雨天频次多,路面存水提升,给蚊虫的繁殖成就了有益的标准;再加上环境温度高,环境湿度适合,蚊虫的孳生和繁殖能力就会提高。但强台风,暴雨对蚊虫孳生不好。暴雨通常将蚊虫孳生地冲洗;水深和流通的水也不利蚊虫孳生。

以上就是我的解答。

通过对研究区土壤、地下水中降解石油菌进行分离和筛选,并进行强化土壤、地下水中石油污染的微生态修复实验,优化最佳修复方法和实施技术,为野外原位实际修复试验提供方法与技术。

一、实验器材、测试方法和实验步骤

1实验材料

化学试剂:MgSO4·7H2O,NH4NO3,CaCl2,FeCl3,KH2PO4,K2HPO4,KCl,(NH4)2SO4,CaCO3,NaCl,可溶性淀粉、蔗糖、乳酸、盐酸、酒石酸钾钠、琼脂、液体石蜡、石油醚、三氯甲烷等均为分析纯。杏子川油田原油(地下2400m采出的原油)、新鲜马铃薯、地下水、杏子川油田区黄土土样,等等。

添加剂:草坪草晾干粉碎(5~10mm),等等。

实验用土壤样品采自陕西省延安市南约5km210国道边,山坡上修路的剖面上为黄土土壤,采样时剖开表层约25cm的表层土,取里面新鲜土壤,为无石油污染样品。土中含有少量2~5mm的小姜石,土壤湿容重为17~193g/cm3;土壤干容重为149~17g/cm3。自然含水量为946%,pH值为81;试验用地下水,pH值为72,TDS含量为370mg/L。

2实验器具

实验用玻璃器皿等:150mL,250mL具塞三角瓶,125mL,1000mL磨口细口试剂瓶,各种不同类型的细菌培养试管、培养皿、橡胶塞。

主要仪器:QZD-1型电磁振荡器、KQ218超声波清洗器、生物恒温培养箱、高速离心机、高压蒸汽灭菌器、无菌实验室、生化培养箱、摇床培养箱、莱卡生物显微镜、752N紫外可见光栅分光光度计、电热干燥箱及各种化学分析用玻璃仪器。

3测试方法

本次实验测试方法是外方合作者德国蒂宾根大学应用地质中心提供的超声—紫外分光光度法,该方法操作简单,灵敏度高,准确。

4实验步骤

根据上述实验和选出的降解石油污染的优势菌群,利用不同的培养基对所选出的各类菌群进行培养并放大培养。各类菌群培养3~5d后进行混合培养,继续培养3~7d后做相应的石油烃降解实验,并进行模拟不同条件下的地下水、土壤石油污染的微生态修复实验。实验装置150mL三角瓶和250mL具塞三角瓶。

地下水石油污染微生态降解模拟实验,用150mL三角瓶每个瓶中加入20mL地下水配制的无菌培养液,加入一定量的原油,接入3mL培养好的菌液,用棉塞封口但要透气,按不同温度条件进行实验,一定的间隔时间取出一瓶样品,分析石油的降解去除的含量。并作无菌对照,按一定时间取样测试石油的变化。

土壤石油污染微生态降解模拟实验,用若干(按实验设计的数量)250mL具塞三角瓶每个瓶中加入10g无菌风干土壤加入5mL营养液,加入一定量的原油,接入3mL培养好的菌液,按不同温度条件进行实验,一定的间隔时间取出一瓶样品,分析土壤中石油的降解去除的含量。同时作同等条件无菌对照,按一定时间取样测试石油的变化。第一批次实验用棉塞,但时间一长则蒸发量大,实验样品干燥影响实验效果,后改为具塞三角瓶,以保证有足够的含水量。在第二次实验中为增强细菌的作用利用草坪草晾干粉碎作为添加剂,该添加剂有两个主要作用:一是改良土壤的膨松剂;另一是以细菌作为营养素的来源。在一定时间取样测试石油含量的变化。

二、石油污染地下水微生态细菌降解的模拟实验

为了实验的准确性,实验分两批次进行,第二批次是在第一批次改进的基础上进行,主要考虑到地下水中温度对实验效果的影响。

1第一批次地下水降解实验

实验是在2007年3月30日至4月27日进行的。实验选择了相对较低的温度:25℃,20℃,15℃。实验结果见表6-8、6-9。

通过上述数据,说明实验取得了初步成功,也验证了微生态技术在地下水石油污染修复中的作用。表6-8、6-9,图6-1显示,由于模拟实验温度的不同导致实验效果不同。在选择的3个温度中,20℃的实验效果要好于15℃和25℃的实验效果,25℃的实验效果要优于15℃的效果。但总的来说,实验效果不是十分理想,实验在第27天时最大去除率仅为41%左右。对照样品中的石油含量变化不大,基本在5%以内,说明在同等温度无菌条件下短时间内地下水中石油降解是缓慢的。

表6-8 第一批次石油污染地下水细菌降解石油含量随时间变化测试结果

表6-9 第一批次石油污染地下水细菌降解石油含量随时间降解率变化结果单位:%

图6-1 第一批次地下水石油污染不同温度条件石油随时间降解率趋势图

2第二批次地下水降解实验

第二批次地下水降解实验,是在2007年6月21日至8月6日进行的。根据第一次实验结果,又选择了相对高一点的温度进行实验,温度为35℃,30℃,25℃,20℃。实验温度升高而且实验时间延长。另外,为了验证实验效果的好坏,每一温度条件同时做一平行实验。实验结果见表6-10、6-11,图6-2~6-4。

表6-10 第二批次石油污染地下水细菌降解石油含量随时间变化测试结果

表6-11 第二批次石油污染地下水细菌降解石油含量随时间降解率结果单位:%

图6-2 第二批次地下水石油污染35℃微生态修复实验石油随时间降解率图

图6-3 第二批次地下水石油污染30℃微生态修复实验石油随时间降解率图

图6-4 第二批次地下水石油污染25℃微生态修复实验石油随时间降解率图

通过上述实验,进一步验证了微生态细菌在地下水石油污染中的修复作用。在选择的4个温度中,30℃的实验效果要好于35℃,25℃和20℃的实验效果,实验在第37天时最大去除率达90%以上。其他温度条件的实验效果基本相同,在30d时石油的去除率为50%左右。在同等条件的平行实验效果也基本一致,得到了相互验证的效果,验证了实验数据的可靠性。

3两批次实验结果对比

通过上述两批次的室内模拟石油污染地下水微生态细菌的降解实验,实验结果得出第一批次石油污染地下水细菌降解石油的模拟实验显示,实验效果不是十分理想,20℃实验在第27天时最大去除率仅为41%左右。但对照样品中的石油含量变化不大,从实验数据看基本在5%以内,说明在同等温度无菌条件下短时间内地下水中石油降解是缓慢的。第二批次实验结果,则进一步验证了微生物细菌在地下水石油污染的修复技术是有较好的修复作用。在选择的4个温度中,30℃的实验效果要好于35℃和25℃,20℃的实验效果。30℃实验在第37天时最大去除率达90%以上。其他温度条件的实验效果基本相同,在30d时石油的去除率为50%左右。在同等条件下的平行实验效果也基本一致,得到了相互验证的效果,说明实验数据的可靠性。

三、石油污染黄土土壤微生态细菌降解修复的模拟试验

为了验证实验的效果和准确性,该实验也分两批次进行,第二批次相对第一批次加入了一组相对高一点的温度。

1第一批次土壤降解实验

实验是在2007年3月30日至5月14日进行的。考虑研究区地表土壤在春、夏、秋温度一般在20~30℃之间,选择了不同的温度段进行实验。温度为30℃,25℃,20℃,以及不同的石油含量进行实验,并在30℃,25℃两个温度选择了平行实验。实验结果见表6-12、6-13和图6-5~6-7。

表6-12 第一批次石油污染土壤细菌降解石油含量随时间变化测试结果

表6-13 第一批次石油污染土壤细菌降解石油含量随时间降解率结果单位:%

虽然模拟实验温度不同,但实验效果基本相同,实验在第45天时去除率都在80%左右。对照样品中的石油含量变化不大,基本在10%以内,说明在相同温度无菌条件下短时间内土壤中石油降解是缓慢的。

图6-5 第一批次土壤石油污染30℃微生态修复实验石油随时间降解率图

图6-6 一批次土壤石油污染25℃微生态修复实验石油随时间降解率图

图6-7 一批次土壤石油污染20℃微生态修复实验石油随时间降解率图

2第二批次土壤修复模拟实验

实验进行于2007年6月21日至8月6日。实验选择了相对高一点的温度进行,实验温度为35℃,30℃。利用草坪草(晾干粉碎)作为添加剂,添加量为5%。每一温度条件同时做一平行实验。实验结果见表6-14、6-15,图6-8。

表6-14 二批次石油污染土壤细菌降解石油含量随时间变化测试结果

表6-15 第二批次石油污染土壤细菌降解石油含量随时间降解率结果单位:%

图6-8 第二批次土壤石油污染30℃微生态修复实验石油随时间降解率图

第二批次石油污染土壤细菌降解的模拟实验显示,微生态技术在土壤石油污染的修复中效果良好。虽然模拟实验选择了2个温度,但实验效果基本相同。利用草坪草晾干粉碎作为添加剂,起到了一定的作用,使第二次实验短时间内得到了理想的效果。

3两批次实验结果对比

通过上述两批次的室内模拟石油污染土壤微生态细菌的降解实验,实验结果得出第一批次石油污染土壤细菌降解石油的模拟实验显示,微生物细菌在土壤石油污染的修复是有较好的降解作用。表6-12、6-13,图6-5~6-7显示,虽然模拟实验温度不同,但选择的3个温度为20℃,25℃,30℃的实验效果基本相同。实验在第45天时去除率都在80%左右。有的达85%以上。对照样品中的石油含量变化不大,从实验数据看基本在10%以内,说明在同等温度无菌条件下短时间内土壤中石油降解是缓慢的。第二批次模拟实验显示,微生物修复确有较好的降解作用。表6-14、6-15,图6-8显示,虽然第二次模拟实验选择了2个温度,但35℃,30℃的实验效果基本相同。实验在第30天时去除率都在85%左右,有的达85%以上。利用草坪草晾干粉碎作为添加剂,起到了一定的作用,使第二次实验时间虽短于第一次时间却增大了去除率,增大5%以上。在同等条件下的平行实验效果也基本一致,得到了相互验证的效果。

四、实验结果与讨论

通过两批次的室内模拟石油污染地下水微生态细菌的降解实验,实验结果显示第一批次石油污染地下水细菌降解石油的模拟实验,实验效果不是十分理想,20℃实验在第27天时最大去除率仅为41%左右。第二批次实验结果,则进一步验证了微生物细菌在地下水石油污染的修复具有一定的修复作用。在选择的4个温度中,30℃的实验效果要好于35℃和25℃,20℃的实验效果。30℃实验在第37天时最大去除率达90%以上。其他温度条件的实验效果基本相同,在30d时石油的去除率为50%左右。在同等条件下的平行实验效果也基本一致,得到了相互验证的效果,说明实验数据的可靠性。对照样品中的石油含量变化不大,从实验数据看基本在5%以内,说明在同等温度无菌条件下短时间内地下水中石油降解是缓慢的。

通过两批次的室内模拟石油污染土壤微生态细菌的降解实验,实验结果显示第一批次石油污染土壤细菌修复具有较好的修复作用。表6-12、6-13,图6-5~6-7显示,虽然模拟实验温度不同,但选择的3个温度为20℃,25℃,30℃的实验效果基本相同。实验在第45天时去除率都在80%左右。有的达85%以上。对照样品中的石油含量变化不大,从实验数据看基本在10%以内,说明在同等温度无菌条件下短时间内土壤中石油降解是缓慢的。第二批次模拟实验显示,微生态对土壤的石油污染治理修复确有较好的降解作用。表6-14、6-15,图6-8显示,虽然第二次模拟实验选择了2个温度,但35℃,30℃的实验效果基本相同。实验在第30天时去除率都在85%左右,有的达85%以上。利用草坪草晾干粉碎作为添加剂,起到了一定的作用,使第二次实验时间虽短于第一次时间却增大了去除率,增大5%以上。在同等条件下的平行实验效果也基本一致,得到了相互验证的效果。

上述室内模拟实验取得了一定的效果,为野外原位试验积累了经验,奠定了基础,提供了技术。

2017临床检验技师《微生物学检验》模拟题及答案

 模拟题一:

 1常用普通离心机为每分钟多少转

 A、1000-9000万转/分钟

 B、2万转/分钟

 C、3万转/分钟

 D、5万转/分钟

 E、10万转/分钟

 正确答案:A

 2离心机根据转数不同可分为几种

 A、1种

 B、2种

 C、3种

 D、4种

 E、5种

 正确答案:C

 3哪一种天平用砝码

 A、差热天平

 B、电子天平

 C、架盘天平

 D、光学分析天平

 E、托盘扭力天平

 正确答案:C

 4如何使用砝码

 A、徒手

 B、专用镊子

 C、垫纸

 D、带手套

 E、普通镊子

 正确答案:B

 5生物安全柜主要原理

 A、干燥

 B、空气经滤膜除菌后定向流动

 C、防潮

 D、通风

 E、空气定向流动

 正确答案:B

 6微生物实验室无菌间应该配备

 A、 灭火器

 B、 喷雾器

 C、 生物安全柜

 D、电扇

 E、 排风扇

 正确答案:C

 7下列霍乱弧菌的选择性培养基属于强选择性的有

 A、碱性琼脂

 B、碱性胆盐琼脂

 C、SS琼脂

 D、4号琼脂

 E、麦康凯琼脂

 正确答案:D

 8可用作霍乱弧菌的运输保存培养基为

 A、碱性蛋白胨水

 B、PV平板

 C、SS琼脂

 D、EC肉汤

 E、GN增菌液

 正确答案:A

 9在三糖铁培养基上,哪两种细菌表现相似

 A、伤寒杆菌与痢疾杆菌

 B、大肠杆菌与痢疾杆菌

 C、大肠杆菌与伤寒杆菌

 D、副溶血弧菌与痢疾杆菌

 E、副溶血弧菌与伤寒杆菌

 正确答案:A

 10副溶血弧菌所致细菌性食物中毒的主要污染食品来自

 A、家畜肉类

 B、海产品

 C、奶制品

 D、禽肉

 E、蛋类

 正确答案:B

 11高压灭菌最佳条件选择

 A、002MPa 1小时

 B、002MPa 1小时

 C、005MPa 1小时

 D、011MPa 20分钟

 E、015MPa 20分钟

 正确答案:D

 12电热恒温干燥箱干热灭菌最佳条件选择

 A、56℃ 3小时

 B、100℃ 2小时

 C、160℃ 2小时

 D、180℃ 2小时

 E、200℃ 1小时

 正确答案:C

 13高速离心机为每分钟多少转

 A、1000-9000转/分钟

 B、1-4万转/分钟

 C、5万转/分钟

 D、8万转/分钟

 E、10万转/分钟

 正确答案:B

 14除菌用陶瓷布氏漏斗为哪种

 A、G3

 B、G4

 C、G5

 D、G6

 E、G7

 正确答案:D

 15除菌用微孔滤摸孔径为那种

 A、08μ

 B、07μ

 C、06μ

 D、05μ

 E、045μ

 正确答案:E

 16等电聚焦凝胶电泳用途

 A、盐的分离

 B、核酸的分离

 C、抗原定量测定

 D、蛋白质的分离

 E、水的净化

 正确答案:D

 17巴氏消毒法,方法之一是

 A、加热60℃30分钟

 B、62℃30分钟

 C、50℃40分钟

 D、70℃10分钟

 E、72℃5分钟

 正确答案:B

 18对于诊断血清不正确的叙述是

 A、多价诊断血清,又称混合诊断血清

 B、单价诊断血清是仅含一个群(型)细菌和相应抗体

 C、因子诊断血清,吸收了其中的共同抗体,仅保留了一种所需的特异抗体

 D、抗O诊断血清是细菌表面抗原(O抗原)免疫动物获得的血清

 E、Vi诊断血清是由表面抗原制备的诊断血清

 正确答案:D

 19在一个大气压下煮沸水温为100℃,一般杀死细菌繁殖体最短需多长时间

 A、1分钟

 B、2分钟

 C、4分钟

 D、5分钟

 E、10分钟

 正确答案:D

 20杀死具有一般抵抗力的有芽胞的细菌煮沸最短时间是

 A、30-60分钟

 B、1-2小时

 C、2-3小时

 D、3-4小时

 E、4-5小时

 正确答案:B

 模拟题二:

 1下列哪种仪器能做微生物化学成分的分析

 A、蛋白测序仪

 B、DNA扩增仪

 C、液相色谱仪

 D、酶标仪

 E、分光光度计

 正确答案:C

 2十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳中,分子量标准蛋白用途,也就是我们常说的蛋白分子量Mark

 A、测算电泳条带分子量

 B、解离蛋白质

 C、加快电泳

 D、混合均匀

 E、催化聚合

 正确答案:A

 3十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳,常用的蛋白染料

 A、考马斯亮兰

 B、溴酚兰

 C、美兰

 D、台酚兰

 E、麝香草酚兰

 正确答案:A

 4琼脂糖凝胶电泳中,EcorⅠ酶切λDNA的用途

 A、测算DNA电泳条带分子量

 B、测算蛋白电泳条带分子量

 C、加快电泳

 D、控制琼脂糖凝胶孔径

 E、调整琼脂糖凝胶分离DNA的片段范围

 正确答案:A

 5十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳中,丙烯酰胺浓度越大,线性分离范围

 A、适中医学全在线wwwmed126com

 B、不变

 C、越大

 D、越小

 E、影响不大

 正确答案:D

 6十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳中,丙烯酰胺浓度越小,线性分离范围

 A、适中

 B、不变

 C、越大

 D、越小

 E、影响不大

 正确答案:C

 7为了达到无菌操作微生物实验室无菌间应该配备

 A、灭火器

 B、喷雾器

 C、紫外灯

 D、电扇

 E、排风扇

 答案:C

 8微生物实验室常用的一种测定核酸浓度的仪器名称

 A、分光光度计

 B、DNA扩增仪

 C、酶标仪

 D、蛋白测序仪

 E、紫外分光光度计

 答案:E

 9该仪器测核酸使用光波波长

 A、240nm

 B、260nm

 C、300nm

 D、400nm

 E、450nm

 答案:B

 10有关志贺菌属的细菌,叙述不正确的是

 A、无荚膜

 B、无鞭毛

 C、无菌毛

 D、无芽孢

 E、可引起菌痢

 答案:C

 11实验室常用的做分子生物学微量试验的设备

 A、注射器

 B、微量可调移液器

 C、微量注射器

 D、电导仪

 E、移液管

 正确答案:B

 12SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离条带,上边的带为

 A、中等分子量

 B、大分子量

 C、小分子量

 D、大小分子量混合

 E、中小分子量混合

 正确答案:B

 13聚丙烯酰胺凝胶电泳分离条带,上边的带为

 A、中等分子量

 B、大分子量

 C、小分子量

 D、大小分子量混合

 E、中小分子量混合

 正确答案:B

 14聚丙烯酰胺凝胶电泳分离条带,下边为

 A、中等分子量

 B、大分子量

 C、小分子量

 D、大小分子量混合

 E、中小分子量混合

 正确答案:C

 15使用丙烯酰胺要特别注意个人防护,因为

 A、丙烯酰胺挥发

 B、丙烯酰胺易然

 C、丙烯酰胺致癌

 D、丙烯酰胺具神经毒

 E、丙烯酰胺易爆炸

 正确答案:D

 16使用溴化乙锭要特别注意个人防护,因为

 A、溴化乙锭挥发

 B、溴化乙锭易然

 C、溴化乙锭致癌

 D、溴化乙锭神经毒

 E、溴化乙锭易爆炸

 正确答案:C

 13聚丙烯酰胺凝胶电泳DNA的染色可用

 A、硝酸银

 B、溴酚兰

 C、美兰

 D、台盘兰

 E、麝香草酚兰

 正确答案:A

 14脉冲电场凝胶电泳DNA的染色可用

 A、溴化乙锭

 B、溴酚兰

 C、美兰

 D、台酚兰

 E、麝香草酚兰

 正确答案: A

 15用那一种物质制备脉冲电场凝胶电泳介质

 A、琼脂糖

 B、淀粉

 C、丙烯酰胺

 D、氯化钠

 E、甘氨酸

 正确答案:A

 20脉冲场凝胶电泳用途

 A、盐的分离

 B、核酸的分离

 C、抗原定量测定

 D、蛋白质的分离

 E、水的净化

 正确答案: B

;

1微生物检测技术的内容简介

第一模块 微生物检验基础 项目一 微生物及微生物检验概述 知识目标 能力目标 背景知识 一、什么是微生物 二、微生物的特点 三、微生物对产品的污染 四、污染的预防与控制 五、微生物检验的任务和意义 六、微生物检验的对象 七、微生物检验的质量管理 八、微生物检验的发展趋势 思考题 阅读小知识:微生物的命名及分类 项目二 微生物的形态结构 知识目标 能力目标 背景知识 一、细菌 二、放线菌 三、酵母菌 四、霉菌 五、病毒 思考题 阅读小知识:小布商成了英国皇家学会的会员 微生物的奠基人——巴斯德 项目三 微生物的生理特性 知识目标 能力目标 背景知识 一、微生物的营养 二、微生物的生长 三、微生物的代谢 思考题 阅读小知识:抗生素的滥用及食品安全 第二模块 微生物检验常规技术 微生物实验室守则 实验室的急救 项目四 微生物培养基的配制 知识目标 能力目标 背景知识 一、培养基的分类 二、选用或设计培养基的基本原则 任务4 1配制常用的微生物培养基 思考题 项目五 消毒灭菌技术 知识目标 能力目标 背景知识 一、消毒灭菌的有关概念 二、消毒灭菌的方法 任务5 1干热灭菌技术及玻璃器皿的灭菌 思考题 任务5 2高压蒸汽灭菌技术及培养基的灭菌 思考题 任务5 3无菌室的消毒处理及超净台的使用 思考题 任务5 4液体过滤除菌 思考题 项目六 微生物的分离、纯化、培养技术 知识目标 能力目标 背景知识 一、接种技术 二、分离纯化技术 任务6 1微生物的接种 思考题 任务6 2微生物纯种的分离培养及菌落 特征观察 思考题 项目七 微生物染色及显微形态观察技术 知识目标 能力目标 背景知识 一、显微技术 二、染色技术 任务7 1普通光学显微镜的使用 思考题 任务7 2细菌的染色及形态结构观察 思考题 任务7 3酵母菌、霉菌的染色及形态结构 观察 思考题 阅读小知识:显微镜 项目八 微生物的计数技术 知识目标 能力目标 背景知识 一、细胞数量的测定 二、细胞生物量的测定 任务8 1显微镜直接计数 思考题 任务8 2平板菌落计数 思考题 项目九 菌种保藏技术 知识目标 能力目标 背景知识 一、菌种保藏的基本原理 二、菌种保藏方法 任务9 1实验室常用简易菌种保藏法 思考题 任务9 2菌种的冷冻真空干燥保藏法 思考题 任务9 3菌种的液氮超低温保藏法 思考题 项目十 血清学检验技术 知识目标 能力目标 背景知识 一、抗原、抗体及血清学反应 二、血清学反应的特点及影响因素 三、血清学反应的基本类型 阅读小知识:单克隆抗体及 生物导弹 第三模块 产品中的微生物检验综合实训 项目十一 微生物检验工作流程与质量控制 知识目标 能力目标 背景知识 一、微生物检验工作流程 二、微生物检测的质量控制 任务11 1对某一检测结果的分析和报告 的撰写 思考题 项目十二 食品的微生物学检验 知识目标 能力目标 背景知识 一、概述 二、食品检样的采集与制备 三、食品检样的保存及送检 四、食品卫生微生物学检验技术 五、食品中致病菌的检测技术 六、食品中霉菌和酵母菌的检验技术 七、微生物快速检测技术 任务12 1食品中细菌总数和大肠菌群的检测 思考题 任务12 2罐头食品商业无菌的检测 思考题 任务12 3酸乳中乳酸菌的检测 思考题 任务12 4食品中粪大肠菌群的检测 思考题 任务12 5纸片法快速检测食品中金** 葡萄球菌 思考题 项目十三 化妆品的微生物学检验 知识目标 能力目标 背景知识 一、概述 二、化妆品的卫生学检验标准 三、化妆品的采集与预处理 四、化妆品的卫生细菌检验 任务13 1化妆品中绿脓杆菌的检测 思考题 项目十四 药品的微生物学检验 知识目标 能力目标 背景知识 一、药品无菌检查法 二、微生物限度检查法 任务14 109%氯化钠注射剂的无菌 检验 思考题 任务14 2咳嗽糖浆中细菌总数、霉菌及 酵母菌总数的测定 思考题 项目十五 环境的微生物学检测 知识目标 能力目标 背景知识 一、空气洁净度的微生物检测 二、水质的微生物学检验 三、活性污泥中微生物生物量的测定 任务15 1生活饮用水中细菌总数和总 大肠菌群的检测 思考题 任务15 2发酵车间空气中微生物的 测定 思考题 任务15 3活性污泥生物相的观察 思考题 附录 附录1 微生物实验室常用玻璃器皿及 洗涤 附录2 实验室常用培养基的配制 附录3 实验室常用染色液的配制 附录4 食品生产相关产品的国家卫生 标准 附录5 《中华人民共和国药典》(2005年版) (二部)微生物限度标准 附录6 化妆品卫生标准(GB7916-87) 参考文献 随着经济的高速发展和加入WTO,我国已全面走向世界经济大舞台,国际、国内贸易迅猛发展,商品贸易快速增加。

在产品的生产企业、流通领域及质量技术监督管理部门,迫切需要从事产品质量控制、商品质量检验、质量技术监督与管理等方面的专业人才,高职高专商品质量检验专业正是为适应这一新。

2微生物常识

微生物的定义 形体微小,结构简单,通常要用光学显微镜和电子显微镜才能看清楚的生物,统称为微生物。

(但有些微生物是可以看见的,像属于真菌的蘑菇、灵芝等。) 1 特点: 个体微小,一般<01mm。

构造简单,有单细胞的,简单多细胞的,非细胞的。进化地位低。

2 分类: 原核类: 三菌,三体。 真核类: 真菌,原生动物,显微藻类。

非细胞类: 病毒,亚病毒 ( 类病毒,拟病毒,朊病毒)。 3 五大共性: 体积小,面积大; 吸收多,转化快微生物; 生长旺,繁殖快; 适应强,易变异; 分布广,种类多。

[编辑本段]微生物的类群 种类 原核:细菌、放线菌、螺旋体、支原体、立克次氏体、衣原体。 真核:真菌、藻类、原生动物。

非细胞类:病毒和亚病毒。 一般地,在中国大陆地区的教科书中,均将微生物划分为以下8大类: 细菌、病毒、真菌、放线菌、立克次体、支原体、衣原体、螺旋体。

1 细菌: (1)定义:一类细胞细短,结构简单,胞壁坚韧,多以二分裂方式繁殖和水生性强的原核生物 (2)分布:温暖,潮湿和富含有机质的地方 (3)结构:主要是单细胞的原核生物,有球形,杆形,螺旋形 基本结构:细胞膜 细胞壁 细胞质 核质 特殊结构:荚膜、鞭毛、菌毛、芽胞 (4)繁殖: 主要以二分裂方式进行繁殖的 (5)菌落: 单个细菌用肉眼是看不见的,当单个或少数细菌在固体培养基啊行大量繁殖时,便会形成一个肉眼可见的,具有一定形态结构的子细胞群落 菌落是菌种鉴定的重要依据不同种类的细菌菌落的大小,形状光泽度颜色硬度透明度都不同 2 放线菌 (1)定义:一类主要成菌丝状生长和以孢子繁殖的陆生性较强的原核生物 (2)分布:含水量较低,有机物较丰富的,呈微碱性的土壤中 (3)形态构造:主要由菌丝组成,包括基内菌丝和气生菌丝(部分气生菌丝可以成熟分化为孢子丝,产生孢子) (4)繁殖:通过形成无性孢子的形式进行无性繁殖 无性繁殖 有性繁殖 (5)菌落:在固体培养基上:干燥,不透明,表面呈致密的丝绒状,彩色干粉 3 病毒 (1) 定义:一类由核酸和蛋白质等少数几种成分组成的“非细胞生物”,但是它的生存必须依赖于活细胞 (2)结构:蛋白质衣壳以及核酸(核酸为DNA或RNA) (3)大小:一般直径在100nm左右,最大的病毒直径为200nm的牛痘病毒,最小的病毒直径为28nm的脊髓灰质炎病毒 (4)增殖:病毒的生命活动中一个显著的特点为寄生性。病毒只能寄生在某种特定的活细胞内才能生活。

并利用会宿主细胞内的环境及原料快速复制增值。在非寄生状态时呈结晶状,不能进行独立的代谢活动。

以 噬菌体为例: 吸附→DNA注入→复制、合成→组装→释放[编辑本段]微生物的特点 一、微生物的化学组成 C,H,O,N,P,S以及其他元素 二、微生物的营养物质 1 水和无机盐 2 碳源:凡能为微生物提供生长繁殖所需碳元素的营养物质 来源 作用 3氮源:凡能为微生物提供所必需氮元素的营养物质 来源 作用:主要用于合成蛋白质,核酸以及含氮的代谢产物 4 能源:能为微生物生命活动提供最初能源来源的营养物质或辐射能 根据碳源和能源分类: 5生长因子:微生物生长不可缺少的微量有机物 能引起人和动物致病的微生物叫病源微生物,有八大类: 1真菌:引起皮肤病。深部组织上感染。

2放线菌:皮肤,伤口感染。 3螺旋体:皮肤病,血液感染 如梅毒,钩端螺旋体病。

4细菌:皮肤病化脓,上呼吸道感染 ,泌尿道感染,食物中毒,败血压症,急性传染病等。 5立克次氏体:斑疹伤寒等。

6衣原体:沙眼,泌尿生殖道感染。 7病毒:肝炎,乙型脑炎,麻疹,艾滋病等。

8支原体:肺炎,尿路感染。 生物界的微生物达几万种,大多数对人类有益,只有一少部份能致病。

有些微生物通常不致病,在特定环境下能引起感染称条件致病菌。 能引起食品变质,腐败,正因为它们分解自然界的物体,才能完成大自然的物质循环。

微生物的作用 微生物对人类最重要的影响之一是导致传染病的流行。在人类疾病中有50%是由病毒引起。

世界卫生组织公布资料显示:传染病的发病率和病死率在所有疾病中占据第一位。微生物导致人类疾病的历史,也就是人类与之不断斗争的历史。

在疾病的预防和治疗方面,人类取得了长足的进展,但是新现和再现的微生物感染还是不断发生,像大量的病毒性疾病一直缺乏有效的治疗药物。一些疾病的致病机制并不清楚。

大量的广谱抗生素的滥用造成了强大的选择压力,使许多菌株发生变异,导致耐药性的产生,人类健康受到新的威胁。一些分节段的病毒之间可以通过重组或重配发生变异,最典型的例子就是流行性感冒病毒。

每次流感大流行流感病毒都与前次导致感染的株型发生了变异,这种快速的变异给疫苗的设计和治疗造成了很大的障碍。而耐药性结核杆菌的出现使原本已近控制住的结核感染又在世界范围内猖獗起来。

微生物千姿百态,有些是腐败性的,即引起食品气味和组织结构发生不良变化。当然有些微生物是有益的,它们可用来生产如奶酪,面包,泡菜,啤酒和葡萄酒。

微生物非常小,必须通过显微镜放大约1000 倍才能看到。比如中等大小的细菌,1000个叠加在一起只有句。

3微生物检测

霉菌和酵母计数操作细则1 设备和材料 1。

1 温箱:25~28℃。 1。

2 振荡器。 1。

3 天平。 1。

4 显微镜。 1。

5 玻塞三角瓶:300mL。 1。

6 试管:15mm150mm。 1。

7 平皿:直径9cm。 1。

8 吸管:1mL及10mL。 1。

9 酒精灯。 1。

10 载物玻片。 1。

11 盖玻片。 1。

12 广口瓶。 1。

13 牛皮纸袋:121℃灭菌20min。 1。

14 金属勺、刀等。 1。

15 试管架。 1。

16 接种针。 1。

17 橡皮 。 2 培养基和试剂 2。

1 马铃薯-葡萄糖琼脂培养基,附加抗菌素,按GB 4789。 28中4。

79规定。 2。

2 孟加拉红培养基:按GB 4789。28中4。

81规定。 2。

3 灭菌蒸馏水。 2。

4 乙醇。 3 操作步骤 3。

1 采样:取样时须特别注意样品的代表性和避免采样时的污染。首先准备好灭菌容器和采样工具,如灭菌牛皮纸袋或广口瓶,金属刀或勺等。

在卫生学调查基础上,采取有代表性的样品。样品采集后应尽快检验,否则应将样品放在低温干燥处。

粮食(包括粮库贮粮,粮店或家庭小量存粮)样品的采集,可根据粮囤或粮垛的大小和类型,分层定点取样,一般可分三层五点,或分层随机采取不同点的样品,充分混合后,取500g左右送检。 小量存粮可使用金属小勺采取上、中、下各部位的混合样品。

谷物加工制品(包括熟饭、糕点、面包等)、发酵食品、乳及乳制品以及其他液体食品,用灭菌工具采集可疑霉变食品250g,装入灭菌容器内送检。 3。

2 以无菌操作称取检样25g(或25mL),放人含有225mL灭菌水的玻塞三角瓶中,振摇30min,即为1:10稀释液。 3。

3 用灭菌吸管吸取1∶10稀释液10mL,注入试管中,另用带橡皮 的1mL灭菌吸管反复吹吸50次,使霉菌孢子充分散开。 3。

4 取1mL1∶10稀释液注入含有9mL灭菌水的试管中,另换一支1mL灭菌吸管吹吸5次,此液为1∶100稀释液。 3。

5 按上述操作顺序做10倍递增稀释液,每稀释一次,换用一支1mL灭菌吸管,根据对样品污染情况的估计,选择3个合适的稀释度,分别在做10倍稀释的同时,吸取1mL稀释液于灭菌平皿中,每个稀释度做2个平皿,然后将凉至45℃左右的培养基注入平皿中,待琼脂凝固后,倒置于25~28℃温箱中,3d后开始观察,共培养观察5d。 3。

6 计算方法:通常选择菌落数在10~150之间的平皿进行计数,同稀释度的2个平皿的菌落平均数乘以稀释倍数,即为每克(或毫升)检样中所含霉菌和酵母数。 3。

7 报告:每克(或毫升)食品所含霉菌和酵母数以个/g(个/mL)表示。

4微生物检测或鉴定技术或方法有哪些

通过显微镜直接观察。

一般来说,在一定的培养条件下(相同的培养基、温度以及培养时间),同种微生物表现出稳定的菌落特征。这些特征包括菌落的形状、大小、隆起程度和颜色等方面。

(见高中生物选系1《生物技术实践》图2-8)因此可以通过显微镜观察菌落特征对微生物种类进行判断。 使用选择培养基培养微生物或人为提供有利于目的菌株生长的条件。

选择培养基,顾名思义其作用是允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他微生物生长。例如,使用以尿素作为唯一氮源的培养基能够培养出可合成脲酶的微生物;在培养基中PH调至酸性有利于霉菌的生长繁殖(抑制细菌的生命活动)等。

选择培养一般是通过观察微生物的同化作用类型或某一特征进行间接判断,得到的微生物往往并不只有一种,但是能够大致确定这些微生物存在的共有特征从而对其分类。

5微生物食品检测的检测方法有哪些

Easy TestTMEasyTestTM测试片利用了特异性酶与特异性显色底物反应的原理,使目标菌与非目标菌呈现可明显区别的不同特异性颜色;EasyTestTM测试片的培养载体采用了无纺布和水溶性营养底物的设计,具有良好的吸水性,可快速吸收测试液,使微生物自动均匀分布于无纺布上,为测试液和营养底物创造了一个固定的混合区域;EasyTestTM测试片为一次性即用产品,操作简便、无需耗费大量人力配制培养基和高压灭菌、后续废弃物的处理工作简单、环保,并且最重要的是可以有效缩短检测时间、提高检测效率,非常适用于食品微生物检测和环境卫生监测。

试验方法选取100份食品样品,包括肉制品、乳制品、蔬菜、豆制品、水果、油炸食品、面点、饮料、水产品、速冻食品和调味品,以国家标准方法GB4789-2010《食品安全国家标准食品微生物学检验》为检测依据,采用EasyTestTM测试片、3MPetrifilmTM测试片和国标的传统培养基法分别测定各个样品的菌落总数、大肠杆菌数和大肠菌群数,再将EasyTestTM测试片的结果分别与3MPetrifilmTM测试片和国家标准中的传统培养法得到的结果进行比较,然后根据相关性判断EasyTestTM测试片的准确度和适用性。 结果分析菌落总数试验EasyTestTM菌落总数测试片以TTC(氯化三苯四氮唑,一种氧化还原指示剂)为显色物质,TTC接受微生物呼吸链产生的氢后可形成非水溶性的红色三苯甲脂,红色三苯甲脂经微生物作用会在EasyTestTM测试片的无纺布上形成红色点状物(EasyTestTM测试片上的菌落分布情况见图3),通过计数红点,即可获得菌落总数。

EasyTestTM菌落总数测试片的培养条件为36±1℃,48±3h。

6细菌感染的微生物学检测方法是怎样的

细菌感染的微生物学检测方法:包括细菌学诊断 (检测及鉴定病原菌);检测病原菌成分(抗原和核酸),以及检测患 者血中特异性抗体。

①细菌学诊断:包括直接镜检、细菌染色检查 法、分离与培养。细菌染色检查法主要包括革兰染色、抗酸染色和荧 光染色后光镜检查。

但很多细菌的形态和染色性缺乏明显特征,仅凭 形态学不能做确切的诊断。②检测病原菌成分:包括抗原检测及核酸 检测。

a抗原检测常用的方法有玻片凝集试验、协同凝集试验、间接 血凝试验、乳胶凝集试验、对流免疫试验、酶免疫技术、免疫荧光技 术和同位素标记技术等。这些试验特异、敏感、简便,即使是在采集样品前患者使用了抗生素,对细菌的培养不易成功,但细菌的抗原仍 能被检测出来。

b核酸检测是近年来广泛应用的分子生物学技术,③抗体的检测,即血清学检测。常用的血清学 试验包括玻片或试管凝集试验、沉淀试验、补体结合试验和冷凝集试验等,可根据病原菌的种类加以选择。

7食品微生物检测检什么

食品中的微生物按照其对人类有无危害可分为两类。

一类是有益菌;例如酵母菌、乳酸菌等,可用来酿造美酒或腌制咸菜;另一类是有害菌,例如大肠菌群及其他肠道性致病菌,它们会引起食物中毒或引发传染病。 食品的微生物检测内容比较多。

其中,反映食品卫生质量的细菌污染指标是菌落总数和大肠菌群。 食品中的细菌数量一般是以单位(g、ml)食品中细菌的个数来计,常用菌落总数来表示。

利用菌落总数一方面可以起到监督食品的清洁状态的作用,另一方面可以用来预测食品的保藏期。大肠菌群是肠道致病菌污染的指示菌,它一般直接或间接来自人与温血动物粪便。

食品中如检出大肠菌群,就表示食品曾受到污染。 菌落总数和大肠菌群是食品的卫生指标,绝大部分食品都需要检验这两个指标是否合格。

其中,菌落总数培养时间是48小时,大肠菌群的检测时间也在24到72小时之间。按照国标要求,菌落总数和大肠菌群是食品企业出厂时必须检验的项目。

除卫生指标之外,食品中还需检验是否含有致病菌(致病菌不得检出),包括霉菌和酵母菌以及沙门氏菌、志贺氏菌、金**葡萄球菌等。 致病菌的种类很多,并非所有食品所检致病菌都相同,常检的致病菌有沙门、志贺氏菌、金**葡萄球菌、溶血性链球菌等。

当然,根据产品的类别不同,检测项目也存在差别,一般可以按照产品和原材料等所属的卫生标准来确定检测的项目。

(一)研究现状

地下多相、多组分流体运移数值模拟是在质量和能量守恒的基础上,建立的多相流体运动以及反映地球化学运移扩散的数学模型,通过离散建立大量的线形或非线形方程组,然后利用计算机计算求解,再通过图像显示模拟结果,达到对工程问题和物理问题乃至相关其他问题研究的目的。CO2地质封存数值模拟就是利用计算机模拟的方法,来解决CO2进入地质封存系统后运移、转化、水-岩-气之间的相互反应、CO2泄漏对浅部含水层影响及诱发的储盖层物性变化等一系列问题,从而指导CO2地质封存工程的实施。

目前,国内外已开展的关于CO2地质封存数值模拟的研究工作包括以下几个方面:

1超临界CO2-水多相流体运动模拟

Pruess等(2003)模拟了均质各向同性咸水含水层中以恒定流量灌注CO2条件下,灌注井井周非等温径向流情况。当忽略重力和惯性力效应时,模拟结果中存在相似变量ζ=R2/t(其中,R为径向流动距离,t为时间),CO2饱和度、溶解CO2质量分数、沉淀盐的体积分数及流体压力都是相似变量的函数。这与O' Sullivan(1981)及Doughty和Pruess(1992)的结果一致。两相流的模拟考虑了CO2和水的相对渗透率及毛细管力作用问题(Van Genuchten,1980),考虑了流体密度、黏度和CO2溶解性随压力、温度和含盐度的变化,以及盐的沉淀导致含水层渗透率的减小等因素。

Doughty和Pruess(2004)利用Fro咸水含水层封存CO2监测资料,反推了CO2灌注后发生的物理和化学过程。他们采用TOUGH2数值模拟软件对两相(液、气)三组分(CO2、水和溶解NaCl)系统进行模拟。考虑15MPa和65℃条件下,超临界CO2在咸水中为非混溶流体,并能部分溶解于咸水的情况,分析了多相流系统边界设定的影响及相对渗透率取值问题,即模拟中对侧向边界的设置为均开(或均闭),结果导致压力的模拟结果与实际相比过低(或过高)。研究表明,由于上覆断层对CO2的封堵作用,侧向边界对CO2弥散羽的影响不大。模拟结果还显示,相对渗透率函数对CO2弥散羽的演化有很强的影响。如何确定一个合适的相对渗透率以表征CO2灌注咸水含水层的变化,仍是亟待解决的问题。Doughty和Pruess模拟了两种CO2残余饱和度条件下的CO2羽扩展随时间的变化,发现存在较大差异。残余饱和度较大的情况下,CO2羽表现出紧缩状,在浮力作用下运移较慢;相反,在残余饱和度较小的情况下,CO2羽流弥散很快,溶解性显著提高。

2多组分反应地球化学运移模拟

水-砂岩-CO2相互作用往往形成一系列次生矿物,或次生矿物组合。Worden et al(2006)通过岩石学和CO2灌注长石砂岩的地球化学模拟表明,北海Magnus油田上侏罗统浊积亚长石砂岩中的铁白云石、高岭石和石英可能具有成因联系。其中,铁白云石中的碳来自有机成因的CO2。Watson et al(2004)通过CO2气与CH4气储集砂岩的比较岩石学研究,证实澳大利亚Otway盆地Ladbroke Grove CO2气储集砂岩中与CO2气灌注有关的次生矿物组合为铁白云石-高岭石-次生石英。

Xu et al(2005)利用一维砂岩-页岩系统模型模拟了储层中灌注的CO2与矿物发生的化学反应过程,以及对储层环境的影响。模拟显示,在砂岩环境下,CO2主要被方解石所固定,而方解石的沉淀导致孔隙度减小,进而导致渗透率相应减小。10万年间,砂岩封存能力达到90kg/m3的封存能力,这些被矿物固定下来的CO2可以永久封存。Zwingmann等运用地球化学模拟软件EQ3/6进行的水-矿物-CO2相互作用模拟也表明,若将CO2灌注到日本本州岛中北部新潟盆地更新世灰爪组砂岩,CO2以溶于水和形成碳酸盐矿物两种形式封存,其中后者封存量最大为213mol/kgH2O,可达总封存量的90%,形成的碳酸盐矿物中也出现了片钠铝石。

3耦合岩石力学模拟

从目前发表的论文及各国研究计划的综合报告上看,在CO2咸水含水层封存研究方面,对于CO2运移机制的分析和模拟很少考虑应力场的耦合作用。事实上,CO2灌注压力和超临界CO2的浮力作用将改变地层应力状态,即CO2在上浮运移和侧向扩散过程中,孔隙压力可能会对原始裂隙和断裂产生影响;CO2在咸水含水层中的长时期(千年级尺度以上)的封存,将改变含水层的地球化学状态,CO2-咸水-含水层矿物的化学作用将可能导致岩体力学和水力学性质发生变化。

日本因位于4大板块交界处与环太平洋构造带中,活断层密集发育,地震频繁,地应力分布复杂,在CO2地质封存评价方面,非常重视CO2地质封存的力学稳定性研究(李琦等,2002;李小春等,2003)。李琦等(2002;2004;2006)提出了一个考虑初始地应力场、灌注压力、CO2浮力及含热传导作用的热-水-力(THM)耦合模拟框架,考虑盖层底部附近存在不同倾角断层的二维平面应变地质封存问题。采用有限元算法,对灌注CO2流体对断层稳定性的影响进行模拟分析。计算结果表明,为了避免断层位移需要特别注意对灌注压力的控制,因为CO2灌注压力对断层滑动的影响远大于CO2羽流浮力带来的影响。停止灌注CO2后,CO2羽流的上升则成为应力场扰动的主要因素。

(二)主要软件介绍

近年来,计算机模拟技术在许多研究领域得到了广泛的应用,开发出了许多优秀的模拟软件和程序。同样,可用于研究CO2地质封存的数值模拟软件也很多,主要有PHREEQC、GEM、ECLIPSE、TOUGHREACT、PetroMod、MUFTE-UG和NUFT等,它们都有各自的特点和适用性。在进行数值模拟之前,需对这些数值模拟软件进行评价分析,选择适用于所研究问题的模拟软件。现对国际上常用的几款软件简介如下。

1PHREEQC

PHREEQC是一款用于计算多种低温水文地球化学反应的计算机软件。以离子缔合水模型为基础,PHREEQC可完成以下任务:(1)计算物质形成种类与矿物的溶解饱和指数;(2)模拟地球化学反演过程;(3)计算批反应与一维运移反应。另外,与多组分溶质-运移模型耦合的PHREEQC可生成PHAST,一个用于模拟地下水流系统的三维反应-运移模拟器。但由于PHREEQC是在单相水流的基础上建立的模型,因而不能模拟超临界CO2-水的两相流运动。

PHREEQC最简单的应用就是计算溶液中各种化学物质的分布,以及溶液中矿物与气体的饱和状态。反演模拟功能可推导和量化在流动过程中,能够反应化学物质变化的化学反应方程。PHREEQC可处理的反应方程包括建立矿物、表面配合物、阳离子交换剂、土壤溶液、气体组分单位分压、给定压力或给定体积气相间平衡的物质运移反应。在模拟这些均衡反应的同时,PHREEQC还可以模拟动力化学与生物反应,以及模拟从简单的线性衰变(代谢物降解或放射性衰变)到复杂的依赖于溶液化学组成和微生物数量确定的反应速度。这些反应处理功能可在批反应模拟或一维对流、弥散、反应型运移模拟中使用。

2GEM

GEM v200913(Nghiem et al,2004)是一款用来模拟利用CO2和酸性气体提高石油采收率的模拟器,该模拟器完全耦合了地球化学组成状态方程。GEM采用一步求解法进行状态方程的求解。GEM可以用来模拟:对流和弥散流体、油(或超临界CO2)、气和咸水间的平衡、水相物种间的化学平衡,以及矿物的动态溶解和沉淀。该模拟器采用自适应的隐式离散技术利用一维、二维或者三维模型来模拟孔隙介质中溶质的运移。油相和气相用一个状态方程来模拟,气体在水相的溶解度采用亨利定律模型来计算。水通过蒸发进入到气相、盖层的穿透、热效应和裂隙的封闭作用也可以利用GEM来模拟。

3ECLIPSE

ECLIPSE是一个并行化的可以模拟黑油、组分、热采等问题的成熟软件。1994年,胜利石油管理局引进了ECLIPSE油藏数值模拟串行软件,广泛开展了从油藏到气藏,从常用油田到特殊油气田、从常规模拟研究到特殊模拟研究等多方面的应用。主要模块有主模型、黑油、组分、热采、流线法、运行平台和ECLIPSE Office等。

ECLIPSE是一个商业软件,在使用中其内核部分是封闭的,使用者只能将其作为一个“黑箱”来操作。其不足之处有:不可能免费的获得和随意地使用和修改;无法耦合最前沿的地质流体热力学模型;无法加入更多影响因素来研究具体问题。因此,ECLIPSE不适宜用于前沿科学研究。

4TOUGH2/TOUGHREACT

TOUGH2是Transport of Unsaturated Groundwater and Heat(非饱和地下水流及热流传输)的英文缩写,是一个模拟一维、二维和三维孔隙或裂隙介质中,多相流、多组分及非等温的水流及热量运移的数值模拟程序。TOUGH2使用积分有限差分(Integral Finite Differences,IFD)(图3-8)的方法来解决多相流动和多组分化学运移模拟中的空间离散化问题(Pruess et al,1999s;Xu et al,2004)。为了满足大规模计算需要,Zhang et al(2008)开发了TOUGH2的平行计算版本,即TOUGH2-MP。

该方法在对地质介质的离散化上是比较灵活的,允许使用不规则的网格,十分适合对多区域非均质系统和裂隙岩石系统中流体流动、运移和水岩相互作用的模拟。而对于规则的网格剖分,积分有限差分方法相当于传统的有限差分法。其中,对于任意区域Vn,它的质量(对于水、气体和其他化学组分)和能量(对于热)守恒方程可以用积分的方式(式3-5)表达:

图3-8 积分有限差分法中的空间离散化和几何参数数据构成图

中国二氧化碳地质封存选址指南研究

式中:下角标n为表示一个单元格;下角标m为表示和单元格n互相连接的网格m;Δt为时间步长;Mn为单元格n的平均质量或能量密度;Anm为单元网格n和m交界的面段;Fnm为通过面积为Anm的质量或能量通量;qn为单元格n内单位体积的平均源汇率。

许天福等(1998)在TOUGH2的框架基础之上,增加了多组分溶质运移和地球化学反应的模拟功能,形成了一套较为完善的可变饱和地质介质中非等温多相流体反应地球化学运移模拟软件——TOUGHREACT。该软件不仅包括了TOUGH2的全部功能,而且适用于不同温度、压力、水饱和度、离子强度、pH值和氧化还原电位(Eh)等水文地质和地球化学条件下的热-物理-化学过程。还可以应用于一维、二维或三维非均质(物理和化学的)孔隙或裂隙介质中的相关数值模拟研究。在理论上可以容纳任意数量的以固相、液相或气相存在的化学组分(但是在实际模拟中会受到计算能力和计算时间等硬件条件的限制),并且考虑了一系列化学平衡反应,如溶液中的配合反应、气体的溶解或脱溶、离子吸附作用、阳离子交换及受平衡控制或反应动力学控制的矿物溶解或沉淀反应等。可以说TOUGHREACT、是TOUGH2的升级版,近年来在世界范围内CO2地质封存研究和工程实践中得到了广泛的应用。

除包含TOUGH2所有的功能外,TOUGHREACT还可以应用于一系列的反应性流体和地球化学迁移问题。比如:(1)伴随Kd线性吸附和放射性衰变的污染物迁移问题;(2)在周围环境条件下,自然界中地下水的化学演变;(3)核废料处置地点评估;(4)深部岩层的沉积成岩作用;(5)CO2地质处置。多相流体运动,多组分反应地球化学,各种封存形式封存量以及随时间空间变化;(6)矿物沉积(如表生铜矿富集);(7)自然和补给环境下热水系统中的矿物变化。

通过最近几年相关研究者的不懈努力,TOUGHREACT在实际应用中得到了进一步完善和提高,增加了部分新功能,如水相内部反应动力学和生物降解作用,改进了矿物-水反应表面积计算方法,以及气-水反应中气的活度系数的修正等。

5PetroMod

由德国IES(Integrated Exploration System)公司研究开发的PetroMod多组分、多相态的多维含油气系统模拟软件综合平台已被世界石油业所公认。该软件融入了断层活动性、盐丘上涌和刺穿、火山岩的侵入、气体扩散效应、油气水三相运移和油气吸附模型等相关技术。

该模拟软件平台推出和采用的油气运移组合模拟算法(Hybird)是当今最先进的油气运移模拟算法,既可以保证模拟的精度,又可以极大地提高模拟的运算速度。其中的PetroFlow3D用于油气运移、聚集、圈闭和散失等情况的模拟,同时PetroCharge Express为我们提供了基于图件的油气运移和圈闭模拟的快速分析工具。

6MUFTE-UG

MUFTE-UG是MUFTE和UGMUFTE的结合。MUFTE即多相流(Muliphase Flow)、运移(Transport)和能量(Energy)模型。该软件包主要包括物理模型概念和孔隙裂隙介质中等温和非等温多相多组分流动和运移过程的离散方法(Helmig,1997;Helmig et al,1998)。它能对裂隙孔隙介质进行离散性描述(Dietrich et al,2005)。UG是非结构性网格(Unstructured Grid)的缩写,它提供的数据结构能快速解算以平行、自适应多网格法为基础的离散型偏微分方程。具有模块化结构的MUFTE-UG很容易解决各种有特殊要求的问题。

模块化结构的MUFTE-UG具有许多不同的环境与技术应用。例如,在环境应用领域,MUFTE-UG能够模拟如下两个问题。

(1)NAPL(非液相流体)向饱和与非饱和土壤的渗流。优化改进的修复技术在MUFTE中具有广泛的研究和发展空间。

(2)地下CO2的消散。CO2以高温高压灌注地表以下几百米的地层中,MUFTE-UG可用于非均质含水层(对流和弥散运移)中羽状体演化评价,伴随温度效应(由于膨胀和压缩)和组分间相互溶解(卤水和CO2)。

7NUFT

NUFT(Nonisothermal Unsaturated-Saturated Flowand Transport model)是一套用来解决在多孔介质中多相、多组分非等温流动和溶质运移过程中地下污染物运移的数值解法器。此软件利用简单的代码来利用通用的实用程序和输入文件的格式。最近,此代码在Unix和DOS系统下运行成功。

该程序利用一套完整的有限差分空间离散法求解平衡方程组。每一个时间步长内利用Newton-Raphson方法求解非线性方程组,而在每一步迭代过程中利用直接解法和预共轭梯度法求解线性方程组。该模型可以解决一、二和三维水流及溶质运移问题。将来该模型会耦合进毛细滞后、非正交网格离散、有限单元剖分和固体非线性等温吸附等功能。

(三)研究方法

通常情况下,CO2地质封存数值模拟包括以下主要过程。

(1)建立概念模型:根据各种方法获取的实际资料来概化和建立CO2地质封存概念模型,包括边界范围、地层或储盖层高程、储盖层确定、参数及分区、源汇项、主要物理化学过程以及模型维度(一维、二维和三维)。

(2)建立数学模型:建立一套描述深部咸水层中多相流动和多组分反应性溶质运移的偏微分方程组,包括初始条件和边界条件问题。

(3)模型离散化:把概念模型中的各种信息通过网格剖分进行离散,形成大量的网格单元,然后通过有限差分、有限单元和积分有限差分等方法转化成单元的质量和能量守恒方程组,再用多种方法将非线性方程组线性化,形成线性代数方程组,然后求解方程组。

(4)模型识别和校正:根据模型计算结果和实际监测数据进行对比拟合,适度合理调整参数,使模型能够综合反映实际情况。在历史拟合过程中出现较大误差,应重新检查概念模型,修正概念模型。对所建模型进行参数敏感性分析,对于较敏感的参数应该慎重选取,甚至需要做大量的试验来确定。

(5)模型预测:建立了可靠的模型后,便可以进行模拟预测。

数值模拟的关键是地质模型概化、计算精度和计算速度。由于计算的精度取决于离散的程度,而离散的程度又决定了计算的速度,这是一对矛盾,要根据解决问题的需要来选择离散化的程度和计算速度。

CO2在储层中的运移、溶解以及与围岩的化学反应形成了一个多相、多组分的反应体系,涉及的主要数学方程有超临界CO2-水的两相流体运动控制方程、溶质运移控制方程和化学反应方程等。建立数值模型时,通常采用有限差分法、有限元法和积分有限差分法等。

由于实际应用时多采用已有的数值模拟软件对CO2地质封存的某一过程进行模拟,不涉及软件的开发及程序代码的编写,只需根据研究的需要选择合适的软件进行模拟预测,而软件一旦选定,数学模型和数值模型基本上已经确定。

严格按照具体实验规定的流程和方法进行,不能自己决定。

每种指标都有一种或几种检验方法,可根据不同的食品、不同目的来选择恰当的检验方法。通常所用的常规检验方法为现行国家标准,或国际标准,(如FAO标准、WHO标准等),或食品进口国的标准(如美国FDA标准、日本厚生省标准、欧共体标准等)。

食品卫生微生物检验室接到检验申请单,应立即登记,填写试验序号,并按检验要求立即将样品放在冰箱或冰盒中,积极准备条件进行检验。

一般阳性样品发出后3d(特殊情况可适当延长)方能处理样品;进口食品的阳性样品,需保存6个月方能处理。阴性样品可及时处理。

样品检验完毕后,检验人员应及时填写报告单,签名后送主管人核实签字,加盖单位印章,以示生效,并立即交给食品卫生监督人员处理。